1. Eesmärk: selle protseduuri eesmärk on pakkuda standardiseeritud protseduure aseptilisteks toiminguteks ja steriilsete ruumide kaitsmiseks.
2. Kasutusala: bioloogiliste katsete labor
3. Vastutav isik: QC juhendaja testija
4. Definitsioon: puudub
5. Ohutusmeetmed
Mikroobse saastumise vältimiseks järgige rangelt aseptilisi toiminguid;operaatorid peaksid enne steriilsesse ruumi sisenemist UV-lambi välja lülitama.
6.Protseduurid
6.1.Steriilne ruum peaks olema varustatud steriilse operatsiooniruumi ja puhverruumiga.Steriilse operatsiooniruumi puhtus peaks ulatuma klassini 10000. Sisetemperatuuri tuleks hoida 20-24°C ja õhuniiskust 45-60%.Puhta pingi puhtus peaks jõudma 100. klassini.
6.2.Steriilset ruumi tuleks hoida puhtana ja saastumise vältimiseks on rangelt keelatud prügi kuhjamine.
6.3.Vältige rangelt kõigi steriliseerimisseadmete ja söötme saastumist.Need, kes on saastunud, peaksid nende kasutamise lõpetama.
6.4.Steriilne ruum peaks olema varustatud töökontsentratsiooniga desinfitseerimisvahenditega, nagu 5% kresoolilahus, 70% alkohol, 0,1% kloormetioniini lahus jne.
6.5.Steriilset ruumi tuleb regulaarselt steriliseerida ja puhastada sobiva desinfitseerimisvahendiga, et tagada steriilse ruumi puhtuse nõuetele vastamine.
6.6.Kõik instrumendid, instrumendid, nõud ja muud esemed, mis tuleb steriilsesse ruumi tuua, tuleb tihedalt pakendada ja sobivate meetoditega steriliseerida.
6.7.Enne steriilsesse ruumi sisenemist peavad töötajad pesema käsi seebi või desinfitseerimisvahendiga ning seejärel puhverruumis riietuma spetsiaalsetesse tööriietesse, jalanõud, mütsid, maskid ja kindad (või pühkima käsi uuesti 70% etanooliga) enne steriilsesse ruumi sisenemist.Tehke toimingud bakterikambris.
6.8.Enne steriilses ruumis kasutamist tuleb kiiritamiseks ja steriliseerimiseks üle 30 minutiks sisse lülitada steriilses ruumis ultraviolettlamp ning samal ajal õhu puhumiseks sisse lülitada puhas pink.Pärast operatsiooni lõppu tuleb steriilne ruum õigeaegselt puhastada ja seejärel 20 minutit ultraviolettvalgusega steriliseerida.
6.9.Enne kontrollimist tuleb uuritava proovi välispakend hoida puutumata ja seda ei tohi saastumise vältimiseks avada.Enne kontrollimist kasutage välispinna desinfitseerimiseks 70% alkoholiga vatitupsu.
6.10.Iga toimingu ajal tuleks teha negatiivne kontroll, et kontrollida aseptilise toimimise usaldusväärsust.
6.11.Bakteriaalse vedeliku imamisel peate selle imamiseks kasutama imemispalli.Ärge puudutage põhku otse suuga.
6.12.Inokulatsiooninõel tuleb enne ja pärast iga kasutamist leegiga steriliseerida.Pärast jahutamist võib kultuuri inokuleerida.
6.13.Kõred, katseklaasid, Petri tassid ja muud bakterivedelikku sisaldavad nõud tuleb desinfitseerimiseks leotada 5% Lysooli lahust sisaldavas steriliseerimisämbris ning 24 tunni pärast sealt välja võtta ja loputada.
6.14.Kui lauale või põrandale satub bakterivedelikku, tuleb enne töötlemist koheselt vähemalt 30 minutiks saastunud alale valada 5% karboolhappe lahust või 3% lüsooli.Kui tööriided ja mütsid on bakterivedelikuga saastunud, tuleb need pärast kõrgsurveauruga steriliseerimist kohe seljast võtta ja pesta.
6.15.Kõik elusaid baktereid sisaldavad esemed tuleb enne kraani all loputamist desinfitseerida.Kanalisatsiooni reostamine on rangelt keelatud.
6.16.Steriilses ruumis olevate kolooniate arvu tuleb kontrollida kord kuus.Kui puhas pink on avatud, võtke 90 mm siseläbimõõduga steriilsed Petri tassid ja süstige aseptiliselt umbes 15 ml toiteagari söödet, mis on sulatatud ja jahutatud umbes 45 °C-ni.Pärast tahkumist asetage see tagurpidi temperatuurile 30–35 °C. Inkubeerige 48 tundi ℃ inkubaatoris.Pärast steriilsuse tõendamist võtke 3–5 plaati ja asetage need tööasendist vasakule, keskele ja paremale.Pärast kaane avamist ja 30-minutilist eksponeerimist asetage need tagurpidi 30–35°C inkubaatorisse 48 tunniks ja võtke välja.uurima.Mitmesuguste bakterite keskmine arv plaadil 100. klassi puhtal alal ei tohi ületada 1 kolooniat ja klassi 10000 puhta ruumi keskmine arv ei tohi ületada 3 kolooniat.Piirmäära ületamisel tuleb steriilset ruumi põhjalikult desinfitseerida, kuni korduv kontroll vastab nõuetele.
7. Vaadake peatükki (Steriilsuse kontrollimise meetod) jaotistes "Uimastihügieenilised kontrollimeetodid" ja "Hiina ravimikontrolli standardsed tegevustavad".
8. Turustusosakond: kvaliteedijuhtimise osakond
Puhta ruumi tehniline juhend:
Pärast steriilse keskkonna ja steriilsete materjalide saamist peame säilitama steriilset seisundit, et uurida konkreetset teadaolevat mikroorganismi või kasutada nende funktsioone.Vastasel juhul võivad mitmesugused väljastpoolt pärit mikroorganismid kergesti seguneda. Väljastpoolt mitteoluliste mikroorganismide segunemist nimetatakse mikrobioloogias saastavateks bakteriteks.Saastumise vältimine on mikrobioloogilises töös kriitiline tehnika.Täielik steriliseerimine ühelt poolt ja saastumise vältimine teiselt poolt on aseptilise tehnika kaks aspekti.Lisaks peame vältima uuritavate mikroorganismide, eriti patogeensete mikroorganismide või geneetiliselt muundatud mikroorganismide, mida looduses ei eksisteeri, sattumist meie katsekonteinerist väliskeskkonda.Nendel eesmärkidel on mikrobioloogias palju meetmeid.
Steriilne ruum on tavaliselt väike ruum, mis on spetsiaalselt loodud mikrobioloogia laboris.Saab ehitada lehtedest ja klaasist.Pindala ei tohiks olla liiga suur, umbes 4-5 ruutmeetrit, ja kõrgus peaks olema umbes 2,5 meetrit.Puhverruum tuleks rajada väljaspool steriilset ruumi.Puhverruumi uks ja steriilse ruumi uks ei tohiks olla samas suunas, et õhuvool ei tooks sisse mitmesuguseid baktereid.Nii steriilne ruum kui ka puhverruum peavad olema õhukindlad.Siseruumide ventilatsiooniseadmetel peavad olema õhufiltreerimisseadmed.Steriilse ruumi põrand ja seinad peavad olema siledad, raskesti pestava mustuse ja kergesti puhastatavad.Tööpind peab olema tasane.Nii steriilne ruum kui ka puhverruum on varustatud ultraviolettvalgustega.Steriilses ruumis asuvad ultraviolettvalgustid on tööpinnast 1 meetri kaugusel.Steriilsesse ruumi sisenevad töötajad peaksid kandma steriliseeritud riideid ja mütse.
Praegu on steriilsed ruumid enamasti mikrobioloogiatehastes, üldlaborites kasutatakse puhast pinki.Puhta pingi põhiülesanne on laminaarse õhuvoolu seadme kasutamine erinevate pisikeste tolmude, sealhulgas mikroorganismide eemaldamiseks tööpinnalt.Elektriseade laseb õhul läbi hepa filtri ja seejärel siseneda tööpinnale, nii et tööpind on alati voolava steriilse õhu kontrolli all.Lisaks on väliskülje lähedal kiire õhukardin, mis takistab välise bakteriaalse õhu sisenemist.
Keeruliste tingimustega kohtades võib puhta pingi asemel kasutada ka puidust steriilseid kaste.Steriilsel kastil on lihtne struktuur ja seda on lihtne liigutada.Karbi esiküljel on kaks auku, mis on blokeeritud lükatavate ustega, kui see ei tööta.Töötamise ajal saate oma käed sisse sirutada.Esiosa ülemine osa on sisemise töö hõlbustamiseks varustatud klaasiga.Karbi sees on ultraviolettlamp ning küljes oleva väikese luugi kaudu saab sisse panna nõud ja baktereid.
Aseptilised töövõtted ei mängi praegu mitte ainult keskset rolli mikrobioloogilistes uuringutes ja rakendustes, vaid neid kasutatakse laialdaselt ka paljudes biotehnoloogiates.Näiteks transgeenne tehnoloogia, monoklonaalsete antikehade tehnoloogia jne.
Postitusaeg: 06.03.2024