1. Eesmärk: Selle protseduuri eesmärk on pakkuda standardiseeritud protseduuri aseptilisteks toiminguteks ja steriilsete ruumide kaitsmiseks.
2. Kohaldamisala: bioloogilise testimise labor
3. Vastutav isik: kvaliteedikontrolli juhendaja testija
4. Määratlus: Puudub
5. Ohutusabinõud
Mikroobse saastumise vältimiseks tuleb operaatoritel UV-lambid enne steriilsesse ruumi sisenemist välja lülitada.
6. Protseduurid
6.1. Steriilne ruum peaks olema varustatud steriilse operatsioonitoa ja puhverruumiga. Steriilse operatsioonitoa puhtusaste peaks ulatuma klassi 10000. Sisetemperatuur peaks olema 20–24 °C ja õhuniiskus 45–60%. Puhaslaua puhtusaste peaks ulatuma klassi 100.
6.2. Steriilset ruumi tuleb hoida puhtana ja prahi kuhjamine sinna on saastumise vältimiseks rangelt keelatud.
6.3. Vältige rangelt kõigi steriliseerimisseadmete ja -keskkondade saastumist. Saastunud isikud peaksid nende kasutamise lõpetama.
6.4. Steriilne ruum peaks olema varustatud töökontsentratsiooniga desinfitseerimisvahenditega, näiteks 5% kresooli lahus, 70% alkohol, 0,1% kloormetioniini lahus jne.
6.5. Steriilset ruumi tuleks regulaarselt steriliseerida ja puhastada sobiva desinfitseerimisvahendiga, et tagada steriilse ruumi puhtuse vastavus nõuetele.
6.6. Kõik steriilsesse ruumi viidavad instrumendid, nõud ja muud esemed tuleb tihedalt pakkida ja sobivate meetoditega steriliseerida.
6.7. Enne steriilsesse ruumi sisenemist peavad töötajad pesema käed seebi või desinfitseerimisvahendiga ning seejärel vahetama puhverruumis spetsiaalsed tööriided, jalanõud, mütsid, maskid ja kindad (või pühkima käed uuesti 70% etanooliga). Toimingud tuleb läbi viia bakterikambris.
6.8. Enne steriilse ruumi kasutamist tuleb steriilses ruumis ultraviolettlamp kiiritamiseks ja steriliseerimiseks sisse lülitada vähemalt 30 minutiks ning samal ajal tuleb puhas laud õhu puhumiseks sisse lülitada. Pärast operatsiooni lõppu tuleb steriilne ruum õigeaegselt puhastada ja seejärel 20 minutit ultraviolettvalgusega steriliseerida.
6.9. Enne kontrollimist tuleb katseproovi välispakend hoida terve ja seda ei tohi saastumise vältimiseks avada. Enne kontrollimist desinfitseerige välispind 70% alkoholiga immutatud vatitupsudega.
6.10. Iga operatsiooni ajal tuleks teha negatiivne kontroll aseptilise töö usaldusväärsuse kontrollimiseks.
6.11. Bakteriaalse vedeliku imamiseks tuleb kasutada imemispalli. Ärge puudutage kõrt otse suuga.
6.12. Inokulatsiooninõel tuleb enne ja pärast iga kasutamist leegiga steriliseerida. Pärast jahutamist võib kultuuri inokuleerida.
6.13. Bakteriaalset vedelikku sisaldavad kõrred, katseklaasid, Petri tassid ja muud riistad tuleks desinfitseerimiseks leotada steriliseerimisämbris, mis sisaldab 5% Lysoli lahust, ning 24 tunni pärast välja võtta ja loputada.
6.14. Kui lauale või põrandale on sattunud bakteriaalset vedelikku, tuleb saastunud alale viivitamatult valada 5% karboolhappe lahust või 3% lüsooli lahust ja lasta sellel vähemalt 30 minutit mõjuda enne töötlemist. Kui tööriided ja mütsid on bakteriaalse vedelikuga saastunud, tuleb need kohe seljast võtta ja pärast kõrgsurveauruga steriliseerimist pesta.
6.15. Kõik elusbaktereid sisaldavad esemed tuleb enne kraani all loputamist desinfitseerida. Kanalisatsiooni saastamine on rangelt keelatud.
6.16. Steriilses ruumis olevate kolooniate arvu tuleks kontrollida iga kuu. Avatud puhta lauaga võtke mitu steriilset Petri tassi siseläbimõõduga 90 mm ja süstige aseptiliselt umbes 15 ml toiteagarkultuurikeskkonda, mis on sulatatud ja jahutatud umbes 45 °C-ni. Pärast tahkumist asetage see tagurpidi temperatuurile 30–35 °C. Inkubeerige 48 tundi temperatuuril ℃ inkubaatoris. Pärast steriilsuse kontrollimist võtke 3–5 plaati ja asetage need tööasendi vasakule, keskmisele ja paremale küljele. Pärast kaane avamist ja 30-minutilist eksponeerimist asetage need 48 tunniks tagurpidi temperatuurile 30–35 °C inkubaatorisse ja võtke välja. Uurige. Keskmine mitmesuguste bakterite arv plaadil 100. klassi puhtas piirkonnas ei tohiks ületada 1 kolooniat ja keskmine arv 10000. klassi puhtas ruumis ei tohiks ületada 3 kolooniat. Kui piirnorm ületatakse, tuleb steriilset ruumi põhjalikult desinfitseerida, kuni korduvad kontrollid vastavad nõuetele.
7. Vaadake peatükki (Steriilsuse kontrolli meetod) jaotistes "Ravimihügieeni kontrolli meetodid" ja "Hiina ravimite kontrolli standardsed töötavad".
8. Jaotusosakond: kvaliteedijuhtimise osakond
Puhasruumi tehnilised juhised:
Pärast steriilse keskkonna ja materjalide saamist peame säilitama steriilse seisundi, et saaksime uurida konkreetset teadaolevat mikroorganismi või kasutada selle funktsioone. Vastasel juhul võivad mitmesugused väljastpoolt pärit mikroorganismid kergesti seguneda. Mikrobioloogias nimetatakse ebaoluliste väljastpoolt pärit mikroorganismide segunemise nähtust saastavateks bakteriteks. Saastumise vältimine on mikrobioloogilises töös kriitilise tähtsusega tehnika. Täielik steriliseerimine ühelt poolt ja saastumise vältimine teiselt poolt on aseptilise tehnika kaks aspekti. Lisaks peame takistama uuritavate mikroorganismide, eriti patogeensete mikroorganismide või geneetiliselt muundatud mikroorganismide, mis looduses ei eksisteeri, pääsemist meie katsemahutitest väliskeskkonda. Nendel eesmärkidel on mikrobioloogias palju meetmeid.
Steriilne ruum on tavaliselt väike ruum, mis on spetsiaalselt mikrobioloogia laboris sisse seatud. See võib olla ehitatud lehtedest ja klaasist. Pindala ei tohiks olla liiga suur, umbes 4-5 ruutmeetrit, ja kõrgus peaks olema umbes 2,5 meetrit. Steriilse ruumi välisküljele tuleks paigutada puhverruum. Puhverruumi ja steriilse ruumi uks ei tohiks olla samas suunas, et õhuvool ei tooks sisse mitmesuguseid baktereid. Nii steriilne ruum kui ka puhverruum peavad olema õhukindlad. Siseruumide ventilatsiooniseadmetel peavad olema õhufiltrid. Steriilse ruumi põrand ja seinad peavad olema siledad, mustusekindlad ja kergesti puhastatavad. Tööpind peaks olema tasane. Nii steriilne ruum kui ka puhverruum on varustatud ultraviolettvalgustitega. Steriilse ruumi ultraviolettlambid asuvad tööpinnast 1 meetri kaugusel. Steriilsesse ruumi sisenevad töötajad peaksid kandma steriliseeritud riideid ja mütse.
Praegu on steriilsed ruumid enamasti mikrobioloogia tehastes, samas kui üldlaboratooriumides kasutatakse puhastuslauda. Puhastuslaua peamine ülesanne on laminaarse õhuvooluseadme abil eemaldada tööpinnalt mitmesuguseid pisikesi tolmuosakesi, sealhulgas mikroorganisme. Elektriline seade laseb õhul läbi HEPA-filtri tööpinnale siseneda, nii et tööpind on pidevalt voolava steriilse õhu kontrolli all. Lisaks on välisküljel kiire õhukardin, mis hoiab ära välise bakteriaalse õhu sisenemise.
Rasketes tingimustes saab puhta laua asemel kasutada ka puidust steriilseid kaste. Steriilsel kastil on lihtne konstruktsioon ja seda on lihtne liigutada. Kasti esiküljel on kaks auku, mis on mittetöötamise ajal sulgetud lükanduksega. Töötamise ajal saab käsi sisse sirutada. Esiosa ülemine osa on sisemise kasutamise hõlbustamiseks klaasiga kaetud. Kasti sees on ultraviolettlamp ning söögiriistu ja baktereid saab sisse panna küljel oleva väikese ukse kaudu.
Aseptilised töömeetodid ei mängi praegu mitte ainult keskset rolli mikrobioloogilistes uuringutes ja rakendustes, vaid neid kasutatakse laialdaselt ka paljudes biotehnoloogiates. Näiteks transgeenses tehnoloogias, monoklonaalsete antikehade tehnoloogias jne.
Postituse aeg: 06.03.2024