1. Eesmärk: selle protseduuri eesmärk on pakkuda standardiseeritud protseduuri aseptilisteks toiminguteks ja steriilsete tubade kaitseks.
2. rakenduse ulatus: bioloogiline testimise labor
3. vastutav isik: QC juhendaja testija
4. määratlemine: puudub
5. Ohutuse ettevaatusabinõud
Teha rangelt aseptilisi toiminguid mikroobide saastumise vältimiseks; Operaatorid peaksid enne steriilse ruumi sisenemist UV -lambi välja lülitama.
6. Kohanevad
6.1. Steriilne tuba peaks olema varustatud steriilse operatsiooniruumi ja puhverruumiga. Steriilse operatsiooniruumi puhtus peaks jõudma klassi 10000. Sisetemperatuuri tuleks säilitada temperatuuril 20–24 ° C ja niiskust tuleks säilitada 45-60%. Puhta pingi puhtus peaks jõudma klassi 100.
6.2. Steriilset tuba tuleks hoida puhtana ja saastumise vältimiseks on rangelt keelatud prahti kuhjata.
6.3. Vältige rangelt kõigi steriliseerimisseadmete ja söötmete saastumist. Need, mis on saastunud, peaksid nende kasutamise lõpetama.
6.4. Steriilne tuba peaks olema varustatud töökontsentratsiooni desinfitseerimisvahenditega, näiteks 5% kresoolilahus, 70% alkohol, 0,1% klormetioniinilahus jne.
6.5. Steriilne tuba tuleks regulaarselt steriliseerida ja puhastada sobiva desinfitseerimisvahendiga, et tagada steriilse ruumi puhtuse vastavus nõuetele.
6.6. Kõik instrumendid, instrumendid, roogad ja muud esemed, mis tuleb steriilsesse ruumi tuua, peaksid olema tihedalt mähitud ja steriliseeritud sobivate meetoditega.
6.7. Enne steriilsesse ruumi sisenemist peavad töötajad pesema käsi seebi või desinfitseerimisega ning seejärel vahetama spetsiaalseteks tööriidetele, kingadele, mütsidele, maskideks ja kindadeks puhverruumis (või pühkida käed uuesti 70% etanooliga) enne steriilse ruumi sisenemist. Tehke operatsioone bakteriaalses kambris.
6.8. Enne steriilse ruumi kasutamist tuleb ultraviolettlamp steriilses ruumis sisse lülitada kiiritamiseks ja steriliseerimiseks rohkem kui 30 minutit ning puhas pink tuleb sisse lülitada, et õhk puhuks samal ajal. Pärast operatsiooni valmimist tuleks steriilne tuba õigel ajal puhastada ja seejärel 20 minutit steriliseerida ultraviolettvalgustusega.
6.9. Enne kontrollimist tuleks katseproovi välimist pakendit hoida puutumata ja saastumise vältimiseks ei tohi seda avada. Enne kontrollimist kasutage välispinna desinfitseerimiseks 70% alkoholivati puuvillapalli.
6.10. Iga operatsiooni ajal tuleks aseptilise töö usaldusväärsuse kontrollimiseks läbi viia negatiivne kontroll.
6.11. Bakteriaalse vedeliku absorbeerimisel peate selle imamiseks kasutama imemispalli. Ärge puudutage õlgi otse suuga.
6.12. Inokulatsiooni nõel tuleb leegi abil steriliseerida enne ja pärast iga kasutamist. Pärast jahutamist saab kultuuri inokuleerida.
6.13. Õled, testitorud, Petri roogad ja muud bakteri vedelikku sisaldavad riistad tuleks leotada desinfitseerimiseks 5% lüsoolilahust sisaldavas steriliseerimis ämbris ning võtta välja ja loputada 24 tunni pärast.
6.14. Kui lauale või põrandale on voolatud bakteriaalne vedelik, peaksite enne selle töötlemist kohe valama saastunud piirkonnale 5% karboolhappelahust või 3% lüsooli. Kui tööriided ja mütsid on saastunud bakterivedelikuga, tuleks need kohe maha võtta ja pärast kõrgsurve auru steriliseerimist pesta.
6.15. Enne kraani alla loputamist tuleb kõik elusaid baktereid sisaldavad esemed desinfitseerida. Kanalisatsiooni saastamine on rangelt keelatud.
6.16. Kolooniate arvu steriilses ruumis tuleks kontrollida igakuiselt. Kui puhas pink on avatud, võtke mitmeid steriilseid Petri roogasid, mille sisemise läbimõõt on 90 mm, ja süstige aseptiliselt umbes 15 ml toitainete agarikultuuri söödet, mis on sulatatud ja jahutatud umbes 45 ° C -ni. Pärast tahkestamist asetage see ℃ ℃ inkubaatoris 48 tundi inkubeerunud 30–35 tagurpidi. Pärast steriilsuse tõestamist võtke 3–5 taldrikut ja asetage need tööasendi vasakule, keskele ja paremale. Pärast katte avamist ja nende 30 minutit paljastamist asetage need 48 tunniks tagurpidi 30–35 ° C inkubaatorisse ja viige need välja. uurida. Klassi 100 puhta piirkonnas plaadil olevate mitmesuguste bakterite keskmine arv ei tohi ületada ühte kolooniat ja klassi 10000 puhta ruumi keskmine arv ei tohi ületada 3 kolooniat. Kui piir on ületatud, tuleks steriilne tuba põhjalikult desinfitseerida, kuni korduvad kontrollid vastavad nõuetele.
7. Vt peatükki (steriilsuse kontrollimismeetod) jaotises "Ravimite hügieeniline kontrollimeetodid" ja "Hiina standardsed tööpraktikad uimastite kontrollimiseks".
8. turustusosakond: kvaliteedijuhtide osakond
Puhas tuba tehnilised juhised:
Pärast steriilse keskkonna ja steriilsete materjalide hankimist peame hooldama steriilset olekut, et uurida konkreetset teadaolevat mikroorganismi või kasutada nende funktsioone. Vastasel juhul võivad erinevad mikroorganismid väljastpoolt hõlpsalt seguneda. Väljastpoolt pärit ebaoluliste mikroorganismide segunemise nähtust nimetatakse mikrobioloogias saastavateks bakteriteks. Saastumise ennetamine on mikrobioloogilise töö kriitiline tehnika. Täielik steriliseerimine ühelt poolt ja saastumise ennetamine teiselt poolt on aseptilise tehnika kaks aspekti. Lisaks peame takistama uuritavaid mikroorganisme, eriti patogeenseid mikroorganisme või geneetiliselt muundatud mikroorganisme, mida looduses ei eksisteeri, põgenedes meie eksperimentaalsetest konteineritest väliskeskkonda. Nendel eesmärkidel on mikrobioloogias palju meetmeid.
Steriilne tuba on tavaliselt väike tuba, mis on spetsiaalselt üles seatud mikrobioloogia laboris. Saab ehitada lehtede ja klaasiga. Piirkond ei tohiks olla liiga suur, umbes 4-5 ruutmeetrit ja kõrgus peaks olema umbes 2,5 meetrit. Puhverruum tuleks üles seada steriilse ruumi väljapoole. Puhverruumi uks ja steriilse ruumi uks ei tohiks silmitsi seista sama suunaga, et vältida õhuvoolu mitmesuguseid baktereid. Nii steriilne tuba kui ka puhverruum peavad olema õhukindlad. Siseventilatsiooniseadmetes peavad olema õhu filtreerimise seadmed. Steriilse ruumi põrand ja seinad peavad olema siledad, raskesti sadamad ja hõlpsasti puhastatavad. Tööpind peaks olema tasane. Nii steriilne tuba kui ka puhverruum on varustatud ultraviolettvalgustitega. Ultraviolettkiirguse tuled steriilses ruumis asuvad tööpinnast 1 meetri kaugusel. Steriilsesse ruumi sisenevad töötajad peaksid kandma steriliseeritud riideid ja mütse.
Praegu eksisteerivad steriilsed ruumid enamasti mikrobioloogiavabrikutes, samal ajal kui üldsed laborid kasutavad puhast pinki. Puhta pingi peamine funktsioon on laminaarse õhuvoolu seadme kasutamine mitmesuguste pisikeste tolmude, sealhulgas mikroorganismide eemaldamiseks tööpinnal. Elektriseade võimaldab õhk läbi HEPA -filtri ja siseneda seejärel tööpinnale, nii et tööpind hoitakse alati voolava steriilse õhu kontrolli all. Veelgi enam, väljastpoolt asuva külje lähedal on kiire õhu kardin, et vältida välise bakterite õhku sisenemist.
Raskete tingimustega kohtades saab puhta pingi asemel kasutada ka puidust steriilseid kaste. Steriilsel kastil on lihtne struktuur ja seda on lihtne liigutada. Karbi esiküljel on kaks auku, mis blokeeritakse tõukepulgaustega, kui need ei tööta. Saate käed operatsiooni ajal sirutada. Esikülje ülemine osa on sisemise toimimise hõlbustamiseks varustatud klaasiga. Karbis on ultraviolettlamp ning küljele saab väikeste ukse kaudu sisse panna riistu ja baktereid.
Aseptilised töövõtted ei mängi praegu mitte ainult mikrobioloogilistes uuringutes ja rakendustes keskset rolli, vaid neid kasutatakse laialdaselt ka paljudes biotehnoloogiates. Näiteks transgeenne tehnoloogia, monoklonaalne antikehade tehnoloogia jne.
Postiaeg: märts 06-2024